資源名稱(chēng): 哈茨木霉

種屬: Trichoderma harzianum Rifai

提供形式: 凍干管，斜面培養(yǎng)物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 土壤真菌，有較強(qiáng)的纖維分解能力，對(duì)多種真菌有拮抗作用，是良好的生防菌。

培養(yǎng)基: 綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，二氫鉀二氫鉀 3g，鎂 1.5g，葡萄糖 20g，*1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。

傳代方法: ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。

②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無(wú)菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。

生長(zhǎng)條件: 26℃，好氧。

存儲(chǔ)條件: 2-8℃冷藏
規(guī)格參數(shù)：

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低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備　
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備　
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備　
種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測(cè)；
（6）取液儲(chǔ)存；通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi)，菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
Chaetomium│globosum Kunze 中文名稱(chēng)：球毛殼霉Chaetomium│globosum Kunze分離基物:馬尾松土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：98%

Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod 中文名稱(chēng)：平田頭菇10-2Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：98%

Acidovorax│avenae subsp. citrulli (Schaad et al.) Willems et 中文名稱(chēng)：燕麥?zhǔn)染鞴蟻喎NAcidovorax│avenae subsp. citrulli (Schaad et al.) Willems et分離基物:西瓜葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:68生長(zhǎng)條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：98%

Colletotrichum│ampelinum Cavara 中文名稱(chēng)：葡萄炭疽盤(pán)孢菌Colletotrichum│ampelinum Cavara分離基物:果實(shí)提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25-29存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：98%

Phyllosticta│lycopersici Peck 中文名稱(chēng)：番茄葉點(diǎn)菌Phyllosticta│lycopersici Peck分離基物:葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:26-28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：98%

Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 中文名稱(chēng)：貝氏葡萄座腔菌梨化型Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物:蘋(píng)果提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：99%

Cochliobolus│lunatus R.R. Nelson & F.A. Haasis 中文名稱(chēng)：新月彎孢霉Cochliobolus│lunatus R.R. Nelson & F.A. Haasis分離基物:月季提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：99%

Phomopsis│rojana Gaja 中文名稱(chēng)：柿苗擬莖點(diǎn)霉Phomopsis│rojana Gaja分離基物:柿提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度：98%
哈茨木霉Bcl-xL  Bcl-xL蛋白抗體*2-甲氧基噻吩IFN- Beta (Interferon Beta) human  干擾素-β抗原

BBC3/PUMA  p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體*2-甲氧基噻吩PSCA  前列腺干細(xì)胞抗原

phospho-Bcl-xL(Ser62)  磷化Bcl-xL(pSer62)抗體*2,3-二苯基喹喔啉ADH/AVP peptide  抗利尿激素/血管升壓素抗原（和肽素）

BCHE (NT)  丁酰膽酯酶抗體(N端)對(duì)甲苯磺酰胺2,3-二苯基喹喔啉PRRSV M protein  豬藍(lán)耳病病M蛋白

BCHE  丁酰膽酯酶單克隆抗體對(duì)羥基苯R)-3-氨基-1-芐基Newcastle disease virus/HRP  雞新城疫疫苗（雞瘟4型混合病）偶聯(lián)辣根過(guò)氧化物酶

BCHE (CT)  丁酰膽酯酶抗體(C端)*(R)-3-氨基-1-芐基sIgA  大鼠分泌型IgA(抗原)

BDNF  腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體*(S)-1-芐基-3-氨基Melamine/KLH  三聚氰胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物

BECN1  BECLIN-1抗體* (S)-1-芐基-3-氨基Melamine/BSA  三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物