商品屬性：

商品詳情：
細(xì)胞別稱： NCM460

種屬來源： 人

組織來源： 結(jié)腸

生長特性： 貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)： 上皮細(xì)胞樣

生物安全等級(jí)： 1

細(xì)胞規(guī)格： 1 × 106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測： 無

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1642 BCRC; 60050 BCRJ; 0145 ECACC; 90020104

培養(yǎng)基： RPMI-1640＋ 10% FBS＋ 1% P/S

培養(yǎng)條件： 95%空氣+5%CO2 ，溫度：  37℃

凍存條件： 60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基：+30%FBS+10%DMSO

傳代比例： 1:2-1:6 ，每 2-3 天換液一次

安全性 所有腫瘤細(xì)胞和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性 ，建議在二級(jí)生物安全 臺(tái)內(nèi)操 作 ，并做好個(gè)人防護(hù)。

用途 僅供科研使用
細(xì)胞系培養(yǎng)步驟：

細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。

細(xì)胞復(fù)蘇?：

將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。

將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。

這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。

細(xì)胞復(fù)蘇?：

將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。

將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

細(xì)胞凍存?：

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。

加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。

這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?

細(xì)胞接收后的處理：

1）NCM-460人正常腸上皮細(xì)胞收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

公司正在出售的產(chǎn)品：