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            產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17
             
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            產品名稱:
            SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17
            產品型號:
            產品報價:
            產品特點:
            SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17相關產品:
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              SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17的詳細資料:

            實驗要點及說明:
            1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
            2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
            3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
            4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
            5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
            公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

            產品名稱

            生長特性

            貨號

            SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17

            貼壁生長

            EY-X63369

            ?
            細胞名稱  SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17
            形態(tài)特性: 上皮樣

            生長特性: 貼壁生長

            特征特性: 該細胞來源于表達SV40T抗原的293T細胞;可以產生高滴度的有感染性的逆轉錄病毒。

            培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;4mML-glutamine

            傳代方法: 1:4~1:8傳代;2~3天換液1次。

            傳代情況:

            凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

            支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
            冷凍保存細胞之方法
            冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
            冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
            實驗報告:
            一、分離與培養(yǎng):
            1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
            2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
            3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
            4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
            5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
            二、免疫熒光鑒定:
            1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
            2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
            3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
            4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
            5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
            6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
            操作步驟:
            1、貼壁細胞的消化
            ①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
            ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
            ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
            化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
            ④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
            ⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
            2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
            人正常主氣管上皮細胞;HNTEC/HL-013形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-ALYREF Polyclonal Antibody

            人正常眼瞼上皮細胞;HNEEC/HL-015形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-TLR2 Polyclonal Antibody

            小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-HPSE Polyclonal Antibody

            大鼠正常皮膚角質細胞;RNSK/HL-010形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-PIN1 Polyclonal Antibody

            大鼠正常食管上皮細胞;RNEEC/HL-011形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-NGB Polyclonal Antibody

            大鼠正常食管上皮細胞;RNEEC/HL-012形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-TERF1 Polyclonal Antibody

            乙型肝炎病全基因組轉基因人肝細胞系;HL02-H1形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-Phospho-PRKACA-T197 Polyclonal Antibody

            雜交瘤細胞株;H3N2-CIV-HA-2C5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-PDK3 Polyclonal Antibody

            雜交瘤細胞株;A135形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-UBE2T Polyclonal Antibody

            雜交瘤細胞株;AFM1/3D8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-ATP6V1B1 Polyclonal Antibody

            雜交瘤細胞株;AFB1/3B9形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-AGO2 Polyclonal Antibody

            人支氣管細胞系;HBE-TT形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-GPI Polyclonal Antibody

            人臍靜脈內皮細胞系;HUVEC-T/T形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-NCOR1 Polyclonal Antibody

            雜交瘤細胞株;XX形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-PTPRN Polyclonal Antibody

            雜交瘤細胞株;2D1C11形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-RPL11 Polyclonal Antibody

            人喉癌細胞;Hep-2NS2形態(tài)特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-FMR1 Polyclonal Antibody
            SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17牛乙酰乙檢測(ACAC)ELISA試劑盒HBeAbELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            牛鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA試劑盒HBeAgELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒HBFELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            牛主要組織相容性復合體(MHC/BoLA)ELISA試劑盒HbHELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒HBsAbELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA試劑盒HBsAbELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒HBsAgELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            雞神經膠質纖維性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒HBsAgELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

            產品相關關鍵字: SV40T轉化的人胚腎 細胞(亞系) 293T/17
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